1、 65.020.01 B15 四川省地方标准DB51DB51/T10352010油菜抗菌核病性田间鉴定技术规程 Rule of field-resistance identificationfor Slerotinia sclerotiorum(Lib)de Bary on oilseed rape 2010-2-10 发布 2010-3-1 实施四川省质量技术监督局四川省质量技术监督局 发布 发布 49DB51/T10352010 I 目 次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 病圃设置.1 5 接种.2 6 病情调查.2 7 抗病性评价.2 附录 A.
2、3 附录 B.4 DB51/T10352010 II 前 言 本标准的附录A、附录B是资料性附录.本标准由四川省农业厅提出并归口。本标准由四川省质量监督局批准。本标准起草单位：四川省农业科学院植物保护研究所。本标准主要起草人：张帆、刘勇、曾正宜、周西全、刘世公。DB51/T10352010 1 油菜抗菌核病性田间鉴定技术规程 Rule of Field-Resistance Identification for Slerotinia sclerotiorum(Lib)de Bary on Oilseed Rape 1 范围 本规程规定了油菜菌核病田间鉴定的技术规程，即病圃设置、接种、病情调查、
3、抗病性评价。本标准适用于四川省油菜品种（系）对菌核病的田间抗性鉴定。2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB4285-1989 农药安全使用标准 QBT/T892003 无公害油菜生产技术规程 ISBN/S1676 农作物抗病虫性鉴定方法 3 术语和定义 以下术语和定义适用于本标准。人工接种鉴定 Artificial Inoculation Identific
4、ation 按 一 定 量 接 种 人 工 繁 殖 或 收 集 的 病 原 物，仿 照 自 然 情 况，创 造 发 病 条 件，根据接种对象抗性表现和发病程度确定供试品种抗性级别的一种方法。3.1 田间鉴定 Field Identification 油菜品种（系）种植在病区的试验地，在油菜成熟期对各个参鉴品种（系）发病程度进行调查，与对照品种相比较，经结果分析确定各个油菜品种（系）的相对抗性水平。3.2 对照品种 Control Variety 为了保证抗性鉴定结果的准确性、可靠性，减少年份间和环境条件的差异，选择抗性水平较好且抗性表现稳定的品种作为抗性鉴定试验的对照品种。4.病圃设置 按 I
5、SBN/S1676 农作物抗病虫性鉴定方法进行病圃设置，选择四川省内具有代表性的油菜菌核病常发病区；病圃要求平坦方正、土质肥力均匀、地势低湿、排灌方便，利于菌核病发病的田块。4.1 油菜品种（系）的田间设置 每小区面积为3.3m x 1m，参鉴品种（系）采用随机区组排列，每个参鉴品种（系）种植3行，行窝距0.33 m x 0.33 m，每行种植10穴，每穴双株，重复3次，每组品种种植1组对照品种。DB51/T10352010 2 4.2 对照品种的选择 以抗病性较好的对照品种作为田间抗病性鉴定的对照品种，以各参鉴品种与对照相比的相对抗性来判定各参鉴材料的相对抗性。4.3 栽培技术及管理 按GB
6、4285-1989 及 QBT/T892003 的要求进行。施肥时应增施氮肥，达到苗齐、苗壮、枝叶繁茂利于发病；直播比当地大田最适播种期提前 10-20 天，油菜整个生长期不得使用任何杀菌剂。5.接种 5.1 接种体的制备 所用菌源采自上年油菜茎内菌核，在 PDA 培养基上经培养长出菌丝后扩大培养，至菌丝长满90mm培养皿。将三皿长满菌丝的 PDA 培养基切碎与切细的大白菜（Brassica rapa L.Chinensis Group）叶 400g 充分混匀后制成 1 小区的接种体。5.2 接种方法 将接种体均匀撒在油菜植株叶片上，适量喷水，保持油菜中、下部湿度达85%左右。5.3 接种时间
7、 于油菜初花、盛花期各接种一次。6.病情调查 6.1 调查时间 在油菜成熟期，收获前7-10天进行病情调查。6.2 调查方法及数据处理 按照附录A对症状的描述，逐株调查各小区内发病情况，根据各品种病级数计算各品种（系）的病情指数，病级的划分标准和病情指数、抗性指数的计算方法应依据附录B进行。7.抗病性评价 7.1 评价标准 参鉴油菜品种（系）的病情指数分别与对照品种的病情指数进行比较，以三次重复病指平均数与对照病指进行比较，计算抗性指数（RI）值，见附录 B,以此作为抗性划分依据。在油菜菌核病抗性鉴定中，参鉴品种（系）应进行两年重复鉴定试验，以对照成熟期的发病株率不低于20%作为菌核病人工接种
8、鉴定结果有效性标准。7.2 抗性评价 以油菜品种（系）的抗性指数划分抗性等级，见编制说明。高抗：RI1.2 中抗：RI0.7 抗：0.7 RI 0 感：0RI0.9 中感：0.92.0 DB51/T10352010 3 附录A 油菜菌核病症状（资料性附录）A.1 油菜菌核病的病原及症状 A.1.1 病原菌 油菜菌核病病原菌（Slerotinia sclerotiorum(Lib)de Bary）在分类上属于子囊菌纲，核盘属，核盘菌。A.1.2 油菜菌核病的症状 油菜菌核病在苗期和成株期均可发生，而以成株期为主要发病阶段，病菌能侵害植株地上各部分器官、组织。主要症状为：（1）叶片产生圆形或不规则
9、形的病斑，病斑中心灰褐色，中层暗青色，外围具黄晕。空气干燥时病斑破裂穿孔发展很慢，潮湿时菌丝蔓延迅速全叶腐烂；（2）茎杆上产生不规则的长形白色病斑，后期病部皮层破裂、维管束外露似麻；（3）受害组织在空气干燥时萎缩、干枯，潮湿时则长出白色棉絮状菌丝体；（4）病害中、后期在病部器官内部或表面形成黑色鼠粪状菌核。DB51/T10352010 4 附 录 B 油菜菌核病病级调查方法、病情指数、抗性指数计算方法（资料性附录）B.1 病级调查方法 病害严重度分级标准（成熟期，田间调查）：0 级：无症状；1 级：1/3 以下分枝数发病或主茎有小型病斑，全株受害角果在 1/4 以下；2 级：1/3-2/3 分枝数或主茎中上部发病，全株受害角果在 1/4-2/4；3 级：2/3 以上分枝数或主茎中下部发病，全株受害角果在 2/4-3/4；4 级：全部或绝大部分分枝发病或主茎基部饶茎病斑，全株受害角果达 3/4；B.2 病情指数（DI）计算方法（各病级各病级发病株数）病情指数(DI)=100 调查总株数4 B.3 抗性指数(RI)计算方法 DI DIo 抗性指数(RI)=Ln -Ln 100-DI 100-DI0(DI：供试材料病情指数；DI0：对照品种病情指数，0DI，DI01.0)
