1、ICS 65.150 B52 DB33 浙江省地方标准 DB 33/T 8722012 杂交鳢“杭鳢 1 号”种质要求 Requirements for germplasm of hybrid snakehead“Hangli No.1”Channa maculate()Channa argus()F1 2012-12-21 发布 2013-01-21 实施 浙江省质量技术监督局 发 布 DB33/T 8722012 I 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由浙江省海洋与渔业局提出。本标准由浙江省水产标准化技术委员会归口。本标准起草单位：杭州市农业科学研究院。本标
2、准主要起草人：谢楠、冯晓宇、郭水荣、刘凯、刘新轶、王宇希、姚桂桂。DB33/T 8722012 1 杂交鳢杭鳢 1 号种质要求 1 范围 本标准规定了杂交鳢“杭鳢1号”的术语与定义、主要外部形态特征、生长、遗传学特性、检测方法及检验规则与结果判定等内容。本标准适用于杂交鳢“杭鳢1号”的种质检测与鉴定。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 18654.1 养殖鱼类种质检验 第 1部分：检验规则 GB/T 18654.3 养殖鱼类种质检验 第 3部分
3、：性状测定 GB/T 18654.4 养殖鱼类种质检验 第 4部分：年龄和生长的测定 GB/T 18654.12 养殖鱼类种质检验 第12部分：染色体组型分析 GB/T 18654.13 养殖鱼类种质检验 第13部分：同工酶电泳分析 3 术语与定义 下列术语和定义适用于本标准。3.1 杂交鳢“杭鳢 1 号”Hybrid Snakehead“Hangli No.1”【Channa maculata（）Channa argus（）F1】以珠江水系斑鳢为母本、钱塘江水系乌鳢为父本，通过杂交获得的杂交种 F1。4 主要外部形态特征 4.1 体形与体色 鱼体呈纺锤形，头部尖而扁平，躯干前部浑圆后部侧扁，
4、尾鳍呈圆形。口端位，下颌稍突出。背部青绿色，体侧灰黑色，腹部白色或灰白色。头侧具2条纵行黑色条纹，向后延伸在躯干部呈两列块状斑纹。头部上方具“”形斑纹，尾鳍基部具2至3条弧形斑纹。杂交鳢“杭鳢1号”外形见图1。杂交鳢“杭鳢1号”与亲本斑鳢、乌鳢体形与体色差异见附录A。DB33/T 8722012 2 侧面观 头部背面观 图1 杂交鳢“杭鳢 1 号”外形图 4.2 可数性状 背鳍鳍式为D.0-4248，臀鳍鳍式为A.0-2732，侧线鳞数5164，第一鳃弓外侧鳃耙数812。4.3 可量性状 杂交鳢“杭鳢1号”外部形态主要可量性状见表1。表1 杂交鳢“杭鳢 1 号”外部形态主要可量性状 全长/体长
5、 吻长/体长 头长/体长 眼径/体长 眼间距/体长 杂交鳢“杭鳢 1 号”(n=60)1.1390.055 0.0360.009 0.2530.009 0.0270.013 0.0600.015 5 生长 5.1 生活习性 杂交鳢“杭鳢1号”可摄食人工配合饲料、鲜活鱼虾及冰鲜鱼。水温14 以下停止摄食，江浙地区自然条件下可安全越冬，最适生长水温25 30。5.2 体重与体长关系 杂交鳢“杭鳢1号”体重与体长和关系式为y=0.1965x2.295（体长30 cm35 cm）。式中x代表体长（单位：cm）；y代表体重（单位：g）。6 遗传学特性 6.1 细胞遗传学特性 染色体数：2n=45 染色体
6、组型见图2。DB33/T 8722012 3 图2 杂交鳢“杭鳢 1 号”染色体组型 6.2 生化遗传学特性 杂交鳢“杭鳢1号”肾脏组织乳酸脱氢酶同工酶电泳图谱及电泳扫描图见图3。图3 杂交鳢“杭鳢 1 号”乳酸脱氢酶电泳图谱及扫描图 6.3 分子遗传学特性 以微卫星引物CHA19对杂交鳢“杭鳢1号”及斑鳢、乌鳢DNA进行PCR扩增、电泳，电泳图见图4。如图所示，能同时扩增出160bp条带和168bp条带的可确定为杂交鳢“杭鳢1号”，只扩增出160bp条带的可确定为斑鳢，只扩增出168bp条带的可确定为乌鳢。说明:M:标准分子量；1-7:乌鳢；8-14:斑鳢；15-28:杂交鳢“杭鳢1号”。图
7、4 引物 CHA19PCR 电泳图谱 7 检测方法 DB33/T 8722012 4 7.1 主要外部形态特征检测 按GB/T 18654.3规定的方法进行。7.2 细胞遗传学特性检测 按GB/T 18654.12方法进行。7.3 生化遗传学特性检测 按GB/T 18654.13规定的方法进行。7.4 分子遗传学特性检测 7.4.1 DNA 提取 取肌肉组织，尽量剪碎，用DNA提取试剂盒或常规酚方法提取基因组DNA，TE溶解后-20 保存备用。7.4.2 PCR 扩增 CHA19引物序列为F：CTTGAGAACTGGCGACGTTT，R：TACGAAGAAATCCCCGTCTG。10 L PC
8、R扩增反应体积内含：1XPCR Buffer，1.5 mmolL MgCl2，200 molL dNTP，200 molL上下游引物，0.1U Taq酶，100ng模板DNA，灭菌去离子水补齐。PCR反应程序为：95预变性3 min；94变性30s，53退火30s，72延伸1min，23个循环；最后72延伸10min。7.4.3 电泳 PCR产物经8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，用Puc18DNA/MspI作为标准分子量，快速银染法染色，拍照后观察分析。8 检验规则与结果判定 按GB/T 18654.1的规定执行。DB33/T 8722012 5 A A 附 录 A（资料性附录）杂交鳢“杭鳢
9、 1 号”与亲本斑鳢、乌鳢体形与体色差异 A.1 概述 本资料性附录给出了杂交鳢“杭鳢1号”与亲本斑鳢、乌鳢的体形与体色差异。A.2 杂交鳢“杭鳢 1 号”与亲本斑鳢、乌鳢体形与体色差异 杂交鳢“杭鳢1号”与亲本斑鳢、乌鳢的外形相似，主要差异表现在头长比例与体表斑纹，见图A.1和表A.1。侧面观 头部背面观 图A.1 杂交鳢“杭鳢 1 号”及斑鳢、乌鳢外形图 杂交鳢“杭鳢 1 号”斑鳢 乌鳢 DB33/T 8722012 6 表A.1 杂交鳢“杭鳢 1 号”与斑鳢、乌鳢外形差异 差异部位 杂交鳢“杭鳢1号”斑鳢 乌鳢 头长比例 较乌鳢小 与杂交鳢“杭鳢1号”接近 较杂交鳢“杭鳢1号”及斑鳢大 头部上方斑纹 具“”形斑纹 具“”形斑纹 具“”形斑纹 体侧斑纹 体侧具两列排列整齐的块状斑纹 体侧具两列斑纹，上侧列斑纹呈连续状或少数几处断开，下侧斑纹呈块状整齐排列 体侧斑纹排列不规则，呈块状斑纹 尾鳍基部斑纹 具2至3条弧形斑纹 具2至3条弧形斑纹 无弧形斑纹 _
