1、GB/T5009.88-20084.2.1,278%乙醇溶液(CH:CH:0H):取821mL95%乙醇置1L容量瓶中,用水稀释至刻度,混勾。4.2.2热稳定淀粉街溶液:于0C5C冰箱储存,酶的活性测定及判定标准见附求A。4.2.3蛋白酶:用MES-TRIS级冲液(4.2.9)配成浓度为50mg/mL的蛋白酶溶液,现用现配,于0C5C储存。4.2.4淀粉葡萄糖苷酶溶液:于0一5C储存。4.2.5酸洗硅藻土:取200g硅藻土于600L的2mol/1盐酸中,浸泡过夜,过滤,用蒸馏水洗至滤液为中性,置于525C士5C马福炉中灼烧灰分后备用。4.2.6重铬酸钾洗液:100g重铬酸钾(KzC2O,),用
2、200mL蒸馏水溶解,加入1800mL浓硫酸混合。4.2.7MES:2-(N-吗啉代)乙烷磺酸(C.HNO,SH,O)4.2.8TRIS:三羟甲基氨基甲院(C4H,NO3)。4.2.90.05mol/L MES-TRIS级冲液:称取19.52gMES和12.2 g TRIS,用1.7L蒸馏水溶解,用6mol/L氢氧化钠调pH至8.2,加水稀释至2L。注:一定要根据温度调pH,24C时调pH为8.2:20C时调pH为8.3:28C时调pH为8.1:20C和28C之间的偏差,用内插法校正。4.2.103mol/L乙酸(HAC)溶液:取172mL乙酸,加入700mL水,混匀后用水定容至1L。4.2.
3、110.4g/L溴甲酚绿(C2H,O5Br,S)溶液:称取0.1g溴甲酚绿于研钵中,加1.4mL0.1mol/L氢氧化钠研磨,加少许水继续研磨,直至完全溶解,用水稀释至250L。4.2.12石油醚:沸程3060C。4.2.13丙酮(CH,COCH3)。4.3仪器4.3.1高型无导流口烧杯:400mL或600mL。4.3.2坩埚:具粗面烧结玻璃板,孔径40m60m(国产型号为G2坩埚)。坩埚预处理:坩埚在马福炉中525C灰化6h,炉温降至130以下取出,于洗液中室温浸泡2h,分别用水和蒸馏水冲洗干净,最后用15mL丙酮冲洗后风干。加入约1.0g硅藻土,130烘至恒重。取出坩埚,在干燥器中冷却约1
4、h,称重,记录坩埚加硅藻土质量,精确到0.1mg。4.3.3真空装置:真空泵或有周节装置的抽吸器。4.3.4振荡水浴:有自动“计时-停止”功能的计时器,控温范围60C士2C98C士2C。4.3.5分析天平:灵敏度为0.1mg。4.3.6马福炉:能控温525士5。4.3.7烘箱:105,1303,4.3.8干燥器:二氧化硅或同等的千燥剂。千燥剂每两周130烘干过夜一次。4.3.9pH计:具有温度补偿功能,用pH4.0、7.0和10.0标准缓冲液校正,4.4分析步骤4.4.1样品制备样品处理时若脂肪含量未知,膳食纤维测定前应先脱脂,脱脂步骤见4,4.1.3。4.4.1,1将样品混匀后,70C真空干燥过夜,然后置干燥器中冷却,干样粉碎后过0.3m0.5mm筛。4.4.1,2若样品不能受热,则采取冷冻干燥后再粉碎过筛。4.4.1,3若样品中脂防含量10%,正常的粉碎困难,可用石油醚脱脂,每次每克试样用25mL石油醚,连续3次,然后再干燥粉碎。要记录由石油醚造成的试样损失,最后在计算膳食纤维含量时进行校正。2