1、SN/T3466-20136.2过滤对每一份试样，选用适宜的三个连续稀释度的样液，每个稀释度的样液分别过滤两次。将灭菌的过滤装置连接于真空抽滤瓶上，以无菌操作将无菌滤膜放在抽滤底座上，用不锈钢夹子固定。以无菌操作加10mL20mL无菌蒸馏水于滤器中，加入PT样品匀液10mL,打开真空泵，抽吸过滤，再加入10mL15mL无菌蒸馏水，抽吸过滤，关闭真空泵。用无菌镊子将滤膜取出。6.3培养以无菌操作将滤膜取出，放于预先干燥的TSFA琼脂平板表面上，滤膜和琼脂表面之间应无气泡。将TSFA琼脂平板水平放入培养箱内，361培养48h。6.4菌落计数培养后，对每个TSFA琼脂平板上产生的深、浅绿色菌落进行计
2、数。菌落计数以菌落形成单位(colony-forming units,CFU)表示。25 CFU250 CFU为适宜计数范围。如果不能立即计数，应将平板存放于04，但不得超过24h。7结果与报告7.1菌落总数的计算方法7.1.1若只有一个稀释度的两个平板上的菌落在适宜计数范围内，先计算两个平板菌落数的平均值，将平均值乘以相应稀释倍数，再除以10，作为每克(g)或每毫升(mL)样品中菌落总数结果。7.1.2若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，按式(1)计算：N=C/10(n1+0.1n2)d(1)式中：N样品中菌落数；C平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和；n1第一稀释度（低稀
3、释倍数）平板个数；n2第二稀释度（高稀释倍数）平板个数；d稀释因子（第一稀释度）。示例：稀释度1:100(第一稀释度)1:1000(第二稀释度)菌落数(CFU)232,24433,35N=C/10(n1+0.1n2)d232+244+33+35544=2472.7102+(0.12)10-20.22上述数据按照7.2.2数字修约后，表示为2500或2.5103。7.1.3若所有稀释度的平板上菌落数均超过250CFU,则对最高稀释度的两个平板进行计数，其他平板可记录为多不可计，结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数再除以10计算。7.1.4若所有稀释度的平板上菌落数均少于25CFU,则应按最低稀释度平板的平均菌落数乘以稀释倍数再除以10计算。7.1.5若所有稀释度平板均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数再除以10计算。3
