1、T/ZZB 04052018 I 前 言 本标准按照GB/T 1.12009给出的规则起草。本标准由浙江省品牌建设联合会提出并归口。本标准由绍兴市质量技术监督检测院牵头组织制定。本标准主要起草单位：浙江医药股份有限公司。本标准参与起草单位：浙江医药股份有限公司新昌制药厂、绍兴市质量技术监督检测院（排名不分先后）。本标准主要起草人：求子勤、吴建江、晁红娟、杜锡勇、黄行舟、许新德、张利英、温善萍、吕少风、王建刚、吕红、李晶晶、蒙雅娟。本标准由绍兴市质量技术监督检测院负责解释。T/ZZB 04052018 1 复配食品添加剂 叶黄素微粒 1 范围 本标准规定了复配食品添加剂 叶黄素微粒的基本要求、技
2、术要求、试验方法、检验规则、标签、包装、运输和贮存、质量承诺等。本标准适用于以万寿菊为原料制备的叶黄素，配以适量的抗氧化剂DL-生育酚和载体淀粉等，采用液相超微乳化和淀粉流瞬时成型双层包埋技术工艺制造成的复配食品添加剂 叶黄素微粒，主要用作营养强化剂或食品着色剂。分子式：C40H56O2 相对分子量：568.88（按2016年国际相对原子质量）结构式：OHHO 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 4789.2 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落
3、总数测定 GB 4789.3 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数 GB 4789.4 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验 GB 4789.10 食品安全国家标准 食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验 GB 4789.11 食品安全国家标准 食品微生物学检验 型溶血性链球菌检验 GB 4789.15 食品安全国家标准 食品微生物学检验 霉菌和酵母计数 GB 5009.3 食品安全国家标准 食品中水分的测定 GB 5009.112014 食品安全国家标准 食品中总砷及无机砷的测定 GB 5009.122017 食品安全国家标准 食品中铅的测定 GB/T 6682 分析实
4、验室用水规格和试验方法 GB 6783 食品安全国家标准 食品添加剂 明胶 GB/T 8885 食用玉米淀粉 GB 264052011 食品安全国家标准 食品添加剂 叶黄素 GB 26687 食品安全国家标准 复配食品添加剂通则 GB 29924 食品安全国家标准 食品添加剂标识通则 GB 29942 食品安全国家标准 食品添加剂 维生素E(dl-生育酚)GB/T 30642 食品抽样检验通用导则 T/ZZB 04052018 2 中国药典 2015版四部 USP41(美国药典标准)Lutein Preparation 3 基本要求 3.1 原辅料要求 3.1.1 主要原料食品添加剂 叶黄素应
5、符合 GB 264052011 的规定。3.1.2 抗氧化剂 dl-生育酚应符合 GB 29942 的规定。3.1.3 辛烯基琥珀酸淀粉钠应符合 GB 28303 的规定。3.1.4 明胶应符合 GB 6783 的规定。3.1.5 食用玉米淀粉应符合 GB/T 8885 的规定。3.2 生产工艺和设备 3.2.1 应采用液相超微乳化、高压均质、喷雾包埋、淀粉床流化干燥、筛分及金属探测等工序。3.2.2 应配备液相超微化-超高压乳化-淀粉流瞬时成型相关工程体系。3.3 检验能力 3.3.1 应配备紫外-可见分光光度计、高效液相色谱仪、原子吸收分光光度计等设备。3.3.2 应具备总类胡萝卜素含量、
6、叶黄素含量、玉米黄质含量、干燥失重、铅、总砷、粒度、菌落总数、霉菌和酵母菌、大肠菌群等项目的检测能力。4 技术要求 4.1 外观和性状 本品为红色至红棕色流动性颗粒，有少量白色淀粉粒。4.2 技术指标 应符合表1的要求。表1 技术指标 项目 指标 叶黄素含量，100.0120.0（占标示量）叶黄素（占总类胡萝卜素含量），85.0 玉米黄质（占总类胡萝卜素含量），9.0 其他单一杂质（占总类胡萝卜素含量），1.0 干燥失重，/5.0 铅(以Pb计)/（mg/kg）1.0 总砷(以As计)/（mg/kg）2.0 粒度，/通过孔径为0.84 mm的分析筛/（）100 通过孔径为0.38 mm的分析筛
7、/（）85.0 通过孔径为0.15 mm的分析筛/（）15.0 T/ZZB 04052018 3 表1（续）项目 指标 微生物限度 菌落总数/（cfu/g）1000 霉菌和酵母菌/（cfu/g）100 大肠菌群/（MPN/g）3.0 沙门氏菌/25g 不得检出 金黄色葡萄球菌/25g 不得检出 溶血性链球菌/25g 不得检出 5 试验方法 5.1 一般要求 实验用水应符合GB/T 6682的规定，试验中所用溶液在未注明何种溶剂配制时，均指水溶液。5.2 鉴别 5.2.1 在测定总类胡萝卜素含量试验中，试样液在 446 nm 附近有最大吸收，且 A446/A474 应为 1.091.14。5.2
8、.2 样品溶液中主峰的保留时间应与叶黄素含量检测项下叶黄素保留时间一致。5.3 感观检验 取适量样品置于清洁、干燥的白瓷盘中，在自然光线下观察其色泽和形态。5.4 总类胡萝卜素含量 5.4.1 测试条件 仪器：紫外-可见分光光度计。测定波长：446 nm。5.4.2 溶液配制 5.4.2.1 样品的溶出 精确称取样品100 mg至100 mL的棕色容量瓶中，加5 mL水，在60水浴中超声溶解5 min。冷却上述溶液（用冷却水冷却），用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。过滤，弃去最初的2 mL。（注：在水浴中超声操作时，需查看容量瓶壁，并振摇容量瓶确保无粘附。）5.4.2.2 样品溶液的稀释（稀释倍数为
9、 n）含量规格为5的样品：移取上述过滤液1 mL，于25 mL棕色容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度。含量规格为10的样品：移取上述过滤液1 mL，于50 mL棕色容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度。5.4.3 测定 用1 cm石英比色皿，以无水乙醇为空白，采用紫外-可见分光光度计测定样品溶液在446 nm处的吸光度A，按式（1）计算样品中总类胡萝卜素（以叶黄素计）T含量：T/ZZB 04052018 4 W2550nA%T=）（.(1)式中：T总类胡萝卜素（以叶黄素计）含量，；A样品溶液的在446 nm处吸光度；25501试验液在无水乙醇中波长446 nm处的吸收系数，mL/g.cm-1；n稀释倍数
10、；W样品称样量（g）。5.5 叶黄素、玉米黄素和其他单一物质（占总类胡萝卜素含量）5.5.1 色谱条件 仪器：HPLC色谱仪。色谱柱：Agilent ZORBAX RX-SIL4.6 mm250 mm，粒度5 m；或等效柱。流动相：按正己烷：乙酸乙酯=75：25（V/V）配制，混合均匀后，用0.45 m滤膜过滤，超声脱气后备用。柱温：室温。检测波长：446 nm。流速：1.5 mL/min。进样体积：10 L。系统适应性：取对照溶液注入液相色谱仪，记录色谱图。按叶黄素峰计，理论塔板数不少于5000，叶黄素峰与玉米黄质峰的分离度不少于1.5。5.5.2 溶液配制 空白溶液：用量筒分别量取正己烷7
11、50 mL、乙酸乙酯250 mL于1000 mL容量瓶中，超声脱气30 min，备用。对照溶液：分别称取约10 mg叶黄素和玉米黄质标准品至100 mL棕色容量瓶中，加10 mL三氯甲烷溶解，再加流动相定容至刻度，过滤待用。样品溶液：称取样品适量（约相当于叶黄素10 mg）至100 mL棕色容量瓶中，加2 mL水，在60水浴中超声溶解10 min。冷却至室温，加40 mL无水乙醇，用二氯甲烷定容，过滤，取滤液10 mL于圆底烧瓶，在50下旋转蒸发至干。加1 mL氯仿溶解，再加流动相9 mL，过滤待用。5.5.3 测定 取样品溶液10 L注入色谱仪，记录色谱图，测定叶黄素、玉米黄质或单一杂质的峰
12、面积。按式（2）计算叶黄素、玉米黄素或单一杂质含量（占总类胡萝卜素）（R）：001RRRTV=.(2)式中：R试样中叶黄素、玉米黄质或单一杂质含量（占总类胡萝卜素），；RV叶黄素、玉米黄质或单一杂质的峰面积；RT扣除空白后所有峰的峰面积之和。T/ZZB 04052018 5 按式（3）计算叶黄素含量（X）：TRRXTL=.(3)式中：X试样中叶黄素含量，；RL叶黄素的峰面积；RT扣除空白后所有峰的峰面积之和；T用紫外-可见分光光度法测定的总类胡萝卜素含量，。5.6 干燥失重 按GB 5009.32016第二法中的规定执行。5.7 铅 按GB 5009.122017 第一法中的规定执行。5.8
13、总砷 按GB 5009.112014第一篇第一法或第二法中的规定执行。5.9 粒度 按中国药典 2015版 四部 0982中第二法中的规定执行。5.10 菌落总数 菌落总数按GB 4789.2中的规定执行。5.11 霉菌和酵母菌 霉菌和酵母菌按GB 4789.15中的规定执行。5.12 大肠菌群 大肠菌群按GB 4789.3中的规定执行。5.13 沙门氏菌 沙门氏菌按GB 4789.4中的规定执行。5.14 金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌按GB 4789.10中的规定执行。5.15 溶血性链球菌 溶血性链球菌按GB 4789.11中的规定执行。6 检验规则 6.1 检验分类 T/ZZB 040
14、52018 6 分为出厂检验和型式检验。6.2 抽样 按GB/T 30642中的规定进行。6.3 组批 产品以同一批投料、同一条生产线生产、包装完好的产品为一批，按批编号。6.4 出厂检验 出厂检验项目为鉴别、外观和性状，总类胡萝卜素、叶黄素含量、玉米黄质含量、干燥失重、铅、总砷、粒度、菌落总数、霉菌和酵母菌、大肠菌群，按批检验放行。6.5 型式检验 型式检验为全项目检验，有下列情形之一时，应进行型式检验：a）本产品的原料、工艺、设备有大的改变，应进行型式检验；b）产品停产后，恢复生产时；c）批量生产时，每6个月周期性进行一次；d）出厂检验结果与上述型式检验有较大差异时；e）当用户对产品质量有
15、较大的异议时；f）当国家产品质量监督管理机构提出要求时。7 标签、包装、运输和贮存 7.1 标签 应符合GB 29924和GB 26687的规定。7.2 包装 采用密封包装，包装材料应无毒无害，并符合相应的食品级或药用级标准要求。7.3 运输 运输过程中应避光、防潮、防高温、防止包装破损，不得与有毒有害的物质混运。7.4 贮存 应贮存在密闭、干燥、避光处，不得与有毒有害物质混储。8 质量承诺 8.1 在规定的包装、贮存条件下，自生产之日起原包装保质期为 36 个月。8.2 产品质量有异议的，应在 24 小时内作出处理响应，及时为用户提供服务和解决方案。T/ZZB 04052018 7 A A 附 录 A（规范性附录）HPLC 色谱图 A.1 叶黄素对照品HPLC色谱图见下图。图A.1 叶黄素对照品 HPLC 色谱图 A.2 玉米黄质对照品HPLC色谱图见下图。图A.2 玉米黄质对照品 HPLC 色谱图 _ 叶黄素 玉米黄质
