1、ICS 65.020.01CCS B 17团体标准T/ZNX 0172021农药田间药效试验准则控藻剂防治浮游藻类田间药效试验准则Algaecide against planktonic Guidelines for field efficacy trial2021-11-30 发布浙江省农药工业协会发布2021-12-06 实施全国团体标准信息平台T/ZNX 0172021I目次前言.II1 范围.32 规范性引用文件.33 术语和定义.34 试验条件.35 试验设计和安排.45.1 处理.45.2 小区安排.45.3 施药方式.46 调查、记录和测量方法.56.1 气象、水体资料.56.2
2、 水域管理.56.3 调查方法、时间和次数.56.4 生物调查.76.5 副作用观察.86.6 农产品和水产品的产量和质量.87 结果.8全国团体标准信息平台T/ZNX 0172021II前言本文件按照 GB/T 1.12020 标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由浙江省农药工业协会提出并归口管理。本文件起草单位：宁波三江益农化学有限公司。本文件主要起草人：黄小威、陈俊鹏、张有根、陈润丽、杨婷婷、徐宗余、桑松。全国团体标准信息平台T/ZNX 01720213控藻剂防治浮游藻类田间药
3、效试验准则1范围本文件规定了控藻剂防治田间蓝藻为代表的浮游藻药效小区试验的试验条件、试验设计、调查方法、结果。本文件适用于控藻剂防治田间浮游藻的田间药效小区试验及药效评价。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 12763.6-2007海洋调查规范 第6部分：海洋生物调查GB/T 17378.7-2007海洋监测规范 第7部分：近海污染生态调查和生物监测GB/T 17980.138-2004农药田间药效试验准则（二）第138部分
4、：除草剂防治水生杂草DB32/T 4005-2020淡水浮游藻类监测技术规范3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1控藻剂 algaecides用于控制藻类种群数量的生物和化学用品。5.1浮游藻 planktonic水中营浮游生活方式的藻类，易于在风和水流的作用下作被动运动，不包括细菌（蓝藻除外）和其他植物，淡水中常见浮游藻类主要包括蓝藻（Cyanophyta）、绿藻（Chlorophyta）、硅藻（Bacillariophyta）、裸藻（Euglenophyta）、甲藻（Pyrrophyta）、金藻（Chrysophyta）、黄藻（Xanthophyta）和隐藻（Cryptophyta
5、）等门类。5.1非靶标生物non-target organism与靶标生物共存的生物种群。3.4种群数量 population size指生活在某一特定区的同种生物数量的总和。4试验条件试验对象的选择全国团体标准信息平台T/ZNX 01720214包括蓝藻（Cyanophyta）、绿藻（Chlorophyta）、硅藻（Bacillariophyta）、裸藻（Euglenophyta）、甲藻（Pyrrophyta）、金藻（Chrysophyta）、黄藻（Xanthophyta）和隐藻（Cryptophyta）等在水体中可形成水华危害的浮游藻藻类。试验区域应有有代表性的浮游藻群落，密度应符合试验要
6、求，且分布均匀，浮游藻处于水华爆发期前期。5试验设计和安排5.1处理5.1.1试验药剂注明试验药剂的商品名代号、中文名、通用名、剂型、含量和生产厂家。试验药剂处理设高、中、低及中量的倍量四个剂量（设倍量是为了评价试验药剂对水生植物、水生动物的安全性），或依据协议（试验委托方和试验承担方签订的协议）规定的用药量。5.1.2对照药剂对照药剂应是已登记注册，并在生产中证明有较好药效的产品，一般情况下其剂型和作用方式应与试验药剂相近。特殊情况可视目的而定。设空白对照。如果试验药剂为混剂时，还应设混剂中的各单剂作对照。5.2小区安排5.2.1小区排列试验药剂的不同剂量、不同处理时间、对照药剂、空白对照等
7、小区应随机排列。特殊情况下可以邻近对照排列。5.2.2小区划分和重复次数小区划分：农田、池塘、水产养殖场等封闭场所，整块水体作为一个处理小区，或将水体进行物理隔离，防治交叉污染，每个隔离区域作为一个小区，每小区10 m220m2，平均水深20cm。重复次数：至少4次重复。5.3施药方式5.3.1施药方法施药宜与农业实践相一致，通常按标签要求或合同规定进行，常用喷雾、药土（沙、肥）、定量点滴、甩施等方法。5.3.2施药器械类型应选择生产常用器械，保证药量准确均匀分布，或准确定向喷到应该受药的地方。影响药效、安全性、持效期和选择性的因素（如机具、工作压力、喷头类型）都应记录下来，同时还应记录造成剂
8、量偏差超过10%的因素。5.3.3施药的时间和次数全国团体标准信息平台T/ZNX 01720215按标签或协议要求进行，用药时间与浮游藻、水生植物、水生动物等的生育阶段有关。用药时，浮游藻、水生植物、水生动物的生长状态（萌芽、生育期等）都应记录下来。用药时间如果在标签或协议上没有特别注明，应根据试验目的和试验药剂的特点进行，同一药剂可一次施用或分次用药，但应记录用药次数和具体时间。5.3.4药剂用量和用水量按标签上的用药量和用水量进行试验，用水量在标签或协议上没有说明时，可根据机具类型、作用方式，并结合当地经验进行。药剂用量以有效成分g/m3表示，用水量以L/m3表示。特殊情况视试验目的而定。
9、5.3.5防治病虫和非靶标所用农药/兽药的资料要求如有需要使用其他农药/兽药时，应与试验药剂、对照农药分开使用。应对所有小区进行均匀处理，尽可能减少对试验的干扰，给出准确的使用数据（如药剂名称、用药时间、用药量等）。6调查、记录和测量方法6.1气象、水体资料6.1.1气象资料整个试验期间的气象资料应从试验地或最近的气象站获得，如降雨（降雨类型、降雨量以mm表示）、温度（日平均、最高和最低温度，以表示）、风力、阴晴、光照和相对湿度等资料，特别是施药当日及前后10d的气象资料。整个试验时期影响试验结果的恶劣气候因素，如严重或长期干旱、大雨、冰雹等均须记录。6.1.2水体资料在每个小区设置3个4个监
10、测点，分投药期间及停止投药后两个阶段，对水域进行水质监测，监测项目包括水温、总磷、总氮、氨氮、叶绿素、水温、浊度、pH、硬度等指标。6.2水域管理记录试验水域、水体交换、开沟、肥水、喂饲等管理资料。6.3调查方法、时间和次数6.3.1浮游藻调查6.3.1.1 采样记录小区的靶标浮游藻种群量，药后1d、3d、5d、7d、15 d采用五点取样法对每小区进行调查，采集浮游藻类样品时，需根据采样点位的水深设置采样层次，使用竖式采水器定量采集1L2L水样。水深0m0.5m时，不分层，在表层下0.2m采集；水深0.5m2m时，不分层，在表层下0.5m采集；水深为25m时，分别在表层下0.5m、底层上0.5
11、m各采集一次；水深5m时，则在表层下0.5m处、中层以及底层上0.5m处各采集一次。分层采样按照由浅到深的顺序，使用采水器采集1L5L水样。6.3.1.2 样品处理全国团体标准信息平台T/ZNX 01720216将各层次采集的样品倒入事先准备的清洁水桶充分混匀，然后取1L5L水样装入样品瓶；若需要调查不同深度数据，则将相同深度采集的样品归集混匀，然后分别取1L5L水样装入样品瓶。6.3.1.3 调查计数取样后通过血球计数板记录各个取样点靶标浮游藻细胞数，每个点至少重复计数2次。6.3.1.4 数据计算种群数量防效根据取样方式计算，具体公式如下：%100)(）%（tCKPCKE-（1）式中：E防
12、效，单位为%；CK对照区种群数量，单位为个/mL；Pt处理区种群数量，单位为个/mL。6.3.2叶绿素 a 含量调查6.3.2.1 试剂配制丙酮溶液：量取900mL丙酮（CH3COCH3）与100mL水混合，保存于棕色试剂瓶中。碳酸镁悬浮液（10g/L）：称取1g碳酸镁（MgCO3），加水至100mL，搅匀，保存试剂瓶中待用。6.3.2.2 仪器设备电子分析天平（精确至0.001g）分光光度计：波长必须准确，波带宽度2nm，消光值可读到0.001。玻璃纤维滤膜：直径为47mm的 Whatman GF/C或孔径为0.45m的纤维素酯微孔滤膜。抽滤装置。贮养干燥器。离心机。具塞离心管。竖式采水器（
13、2L）。6.3.2.3采样同6.3.1.1；6.3.2.4样品制备量取200ml500mL水样，加2mL碳酸镁悬浮液（见6.3.2.1），混匀，用玻璃纤维滤膜（Whatman GF/C，直径25mm）或孔径为0.45m的纤维素酯微孔滤膜过滤，过滤负压不得超过50kPa。6.3.2.5样品提取将过滤了样品的滤膜放入具塞离心管，加入10mL丙酮溶液（见6.3.2.1），摇荡，放置冰箱冷藏室中14h24h，提取叶绿素a。若滤得的样品不能及时提取，应将该滤膜抽干、对折，再套上一张滤纸，置于含硅胶的干燥器内，贮存在低于1的冰箱中。全国团体标准信息平台T/ZNX 017202176.3.2.6样品离心离心
14、速度：3000r/min4000r/min；离心时间10min。6.3.2.7样品测定小心将离心的上清液注入测定池。用丙酮溶液（见6.3.2.1）作参比，分别在750nm、664nm、647nm、630nm波长处测定吸光值。其中750nm处的测定，用以校正提取液的浊度，当1cm测定池光程的吸光值超过0.005时，提取液应重新离心。6.3.2.8数据计算分别把在波长664nm、647nm、630nm上测得的吸光值减去750nm下的吸光值，得到校正后吸光值E664、E647、E630。再按公式（2）计算叶绿素a含量。叶绿素a含量的计算公式如下：1000)()08.054.185.11(216306
15、47664aLVVEEEC-（2）式中：Ca藻类叶绿素a含量，单位为g/L；E664、E647、E630各波长下吸光度校正值；V1抽提后定容体积，单位为mL；V2抽滤的样品体积，单位为mL；L比色皿光程，单位为cm。防效公式如下：100)(）%（121aaaCCCE-.（3）式中:E抑制率，单位为%；Ca1对照的叶绿素a含量，单位为g/L；Ca2处理的叶绿素a含量，单位为g/L。6.4生物调查应记载药后1d、3d、5d、7d、15d、30d对药效试验小区中水稻等农作物、水生植物、水生动物药害类型、损失程度，以提供有益的补充资料。药害记载如下：a）如果药害可以计数或测量时，则用绝对值表示。b）其
16、他情况下，则记录药害频率和程度。可以用两种方法估算：c）参照一个分级标准，对每个处理小区的药害分级打分；d）处理小区同不施药区相比较，估算药害相对百分率。全国团体标准信息平台T/ZNX 01720218在所有情况下，农作物、水生植物、水生动物所出现的药害都应准确描述（抑制生长、褪绿、死亡、畸形等）。如需更详细的资料，可参考水生植物药害评价准则。水生植物药害不仅与试验药剂有关，还与其他因素影响有关，而且最终要取决于对照小区的情况。重要的是还要考虑引起药害的逆境条件之间可能的相互作用。这些逆境条件包括不适当的栽培方法、饲养方法、倒伏、虫害、病害、持续高温和冻害、环境污染等。如果试验水体能留到第二年，要观察对后茬水生植物和水生动物的影响。6.5副作用观察对非靶标生物的任何影响都应记录。6.6农产品和水产品的产量和质量农产品和水产品收获要根据当地的农业和渔业实践进行，一次或分期收获，用单位面积的产量或以每个级别的总重量计算。7结果试验数据应用适当的统计方法和参数分析处理，列出原始数据，写出报告，对结果进行分析讨论，提出应用效果评价（产品特点、关键应用技术、药效、药害）及经济效益评价（成本、增产
