1、名师大讲堂2013 高考总复习生物 微生物的实验室培养微生物的实验室培养 名师大讲堂2013 高考总复习生物 4.培养基的配制培养基的配制(1)配制原则配制原则 按照微生物的种类按照微生物的种类、培养的目的选择原料培养的目的选择原料；注意各种营养物质的浓度和比例注意各种营养物质的浓度和比例；PH 要适宜要适宜。(2)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本步骤制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本步骤：计算计算、称量称量、溶化溶化、灭菌灭菌、倒平板倒平板。名师大讲堂2013 高考总复习生物 特别提醒：特别提醒：调节调节 PH 应在灭菌之前。应在灭菌之前。(3)培养基的营养构成培养基的营养构成 各种培养基的具
2、体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。和无机盐。不同培养基还要满足不同微生物对不同培养基还要满足不同微生物对 pH、特殊营养物质以及、特殊营养物质以及氧气的要求。氧气的要求。(4)培养基的制备是否合格的验证：将未接种的培养基放在恒温培养基的制备是否合格的验证：将未接种的培养基放在恒温箱中保温箱中保温 1 天天2 天，若无菌落生长，说明培养基的制备是成天，若无菌落生长，说明培养基的制备是成功的。功的。名师大讲堂2013 高考总复习生物 下列关于细菌的叙述，错误的是下列关于细菌的叙述，错误的是()A硝化细菌能以硝化细菌能以 NH3作为氮
3、源和能源物质作为氮源和能源物质 B某些细菌可以利用光能固定某些细菌可以利用光能固定 CO2合成有机物合成有机物 C生长因子是某些细菌生长过程中需要额外补充的营养物质生长因子是某些细菌生长过程中需要额外补充的营养物质 D培养圆褐固氮菌需要在培养基中加入含氮化合物作为氮源，培养圆褐固氮菌需要在培养基中加入含氮化合物作为氮源，否则不能生存否则不能生存 名师大讲堂2013 高考总复习生物【解析】【解析】某某些细菌如蓝细菌些细菌如蓝细菌(蓝藻蓝藻)、光合细菌以及红螺菌都、光合细菌以及红螺菌都能进行光合作用。生长因子是指微生物生长不可缺少的微量有能进行光合作用。生长因子是指微生物生长不可缺少的微量有机物，
4、主要包括维生素、氨基酸和碱基等。而微生物的营养物机物，主要包括维生素、氨基酸和碱基等。而微生物的营养物质包括水、无机盐、碳源、氮源和生长因子，它们都是要从外质包括水、无机盐、碳源、氮源和生长因子，它们都是要从外界获得补充的。圆褐固氮菌等固氮微生物能够利用空气中的界获得补充的。圆褐固氮菌等固氮微生物能够利用空气中的 N2作为氮源，将作为氮源，将 N2转化成转化成 NH3【答案】【答案】D 名师大讲堂2013 高考总复习生物 1现有两种固体培养基，已知其配制时所加的成分和含量如现有两种固体培养基，已知其配制时所加的成分和含量如下表，用这两种培养基分别去分离土壤中的两种微生物，下表，用这两种培养基分
5、别去分离土壤中的两种微生物，你认为它们适于分离你认为它们适于分离()名师大讲堂2013 高考总复习生物 A.甲培养基适于分离自养型自生固氮菌；乙培养基适于分离异甲培养基适于分离自养型自生固氮菌；乙培养基适于分离异养型自生固氮菌养型自生固氮菌 B甲培养基适于分离异养型自生固氮菌；乙培养基适于分离甲培养基适于分离异养型自生固氮菌；乙培养基适于分离自养型自生固氮菌自养型自生固氮菌 C甲培养基适于分离酵母菌；乙培养基适于分离真菌甲培养基适于分离酵母菌；乙培养基适于分离真菌 D甲培养基适于分离自养型共生细菌；乙培养基适于分离异甲培养基适于分离自养型共生细菌；乙培养基适于分离异养型共生固氮菌养型共生固氮菌
6、 名师大讲堂2013 高考总复习生物 答案：答案：B 解析解析：固氮菌中能独立生存的是自生固氮菌，：固氮菌中能独立生存的是自生固氮菌，甲培养基中含甲培养基中含有的葡萄糖和淀粉是有机物，由此推出该培养基适于分离异养有的葡萄糖和淀粉是有机物，由此推出该培养基适于分离异养型的自生固氮菌；乙培养基中不含有机碳源，所以可用来分离型的自生固氮菌；乙培养基中不含有机碳源，所以可用来分离培养自养型的自生固氮菌。培养自养型的自生固氮菌。名师大讲堂2013 高考总复习生物 无菌技术无菌技术 1灭菌和消毒灭菌和消毒 名师大讲堂2013 高考总复习生物 2.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物无菌技术除
7、了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有有效避免操作者自身被微生物感染的目的。污染外，还有有效避免操作者自身被微生物感染的目的。3实验室常用的消毒方法是煮沸消毒法，此外，人们也常使用实验室常用的消毒方法是煮沸消毒法，此外，人们也常使用化学药剂进行消毒，如用酒精消毒双手、氯气消毒水源等。化学药剂进行消毒，如用酒精消毒双手、氯气消毒水源等。常用的灭菌方法有灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌、干热灭菌，此常用的灭菌方法有灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌、干热灭菌，此外，实验室里还用紫外线、或化学药物进行消毒。外，实验室里还用紫外线、或化学药物进行消毒。名师大讲堂2013 高考总复习生物 下面对发酵工程中灭菌的
8、理解不正确的是下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是()A防止杂菌污染防止杂菌污染 B消灭杂菌消灭杂菌 C培养基和发酵设备都必须灭菌培养基和发酵设备都必须灭菌 D灭菌必须在接种前灭菌必须在接种前 名师大讲堂2013 高考总复习生物【解析】【解析】灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。A 说的是说的是灭菌的目的，因为发酵所用的菌种大多是单一的纯种，整个发灭菌的目的，因为发酵所用的菌种大多是单一的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物酵过程不能混入其他微生物(杂菌杂菌)，所以是正确的；，所以是正确的；B 是错误是错误的，因为灭菌的目的是防止杂菌污染，但实际操作中不可能
9、只的，因为灭菌的目的是防止杂菌污染，但实际操作中不可能只消灭杂菌，而是消灭全部微生物。消灭杂菌，而是消灭全部微生物。C 是正确的，因为与发酵有是正确的，因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌；发酵所用的微生物是灭菌后专关的所有设备和物质都要灭菌；发酵所用的微生物是灭菌后专门接种的，灭菌必须在接种前，如果接种后再灭菌就会把所接门接种的，灭菌必须在接种前，如果接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死菌种也杀死。【答案】【答案】B 名师大讲堂2013 高考总复习生物 2关于灭菌和消毒的不正确的理解是关于灭菌和消毒的不正确的理解是()A灭菌是指杀死环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子灭菌是指杀死环境中的一切微
10、生物的细胞、芽孢和孢子 B消毒和灭菌实质上是相同的消毒和灭菌实质上是相同的 C接种环用烧灼的方法灭菌接种环用烧灼的方法灭菌 D常用灭菌方法有加热法、过滤法、红外线法、化学药品常用灭菌方法有加热法、过滤法、红外线法、化学药品法法 名师大讲堂2013 高考总复习生物 答案：答案：B 解析解析：消毒是使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面：消毒是使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子不包括芽孢和孢子)，灭菌，灭菌则是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽则是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包
11、括芽孢和孢子。孢和孢子。名师大讲堂2013 高考总复习生物 1微生物的纯化培养包括制备琼脂固体培养基和纯化微生物。微生物的纯化培养包括制备琼脂固体培养基和纯化微生物。2纯化大肠杆菌的原理纯化大肠杆菌的原理 通过平板划线或稀释涂布等方法能将聚集在一起的大肠杆通过平板划线或稀释涂布等方法能将聚集在一起的大肠杆菌分散或稀释成单个细胞，通过培养使其长成单个的菌落，菌分散或稀释成单个细胞，通过培养使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个经过纯化的大肠杆菌菌落。这个菌落就是一个经过纯化的大肠杆菌菌落。微生物的纯化培养技术微生物的纯化培养技术 名师大讲堂2013 高考总复习生物 3纯化微生物的方法：平板划线纯化
12、微生物的方法：平板划线法、稀释涂布平板法。法、稀释涂布平板法。4平板划线操作的注意事项平板划线操作的注意事项 第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌。第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌。灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。高杀死菌种。划线时最后一区域不要与第一区域相连。划线时最后一区域不要与第一区域相连。划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。名师大讲堂2013 高考总复习生物 下列平板划线的操作正确的是下列平板划线的操作正确的是()A使用已经灭菌的接种环
13、、培养皿，操作过程中不再灭菌使用已经灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌 B打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞上棉塞 C将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可即可 D最后将平板倒置，放入培养箱中培养最后将平板倒置，放入培养箱中培养 名师大讲堂2013 高考总复习生物【解析】【解析】接种环在每次划线前及划线结束后均需灼烧，故接种环在每次划线前及划线结束后均需灼烧，故 A错；打开装菌种的试管棉塞后需通过火焰灭菌，才能取菌种，错；打开装菌种的试管棉塞后需通过火
14、焰灭菌，才能取菌种，取出菌种后试管口需再次通过火焰才能塞上棉塞，取出菌种后试管口需再次通过火焰才能塞上棉塞，B 错；为了错；为了使菌种分散成单个细胞，必须多次灼烧、划线，故使菌种分散成单个细胞，必须多次灼烧、划线，故 C 错。错。【答案】【答案】D 名师大讲堂2013 高考总复习生物 3涂布平板操作需用到涂布平板操作需用到()A接种环、滴管、酒精灯接种环、滴管、酒精灯 B接种环、酒精灯、移液管接种环、酒精灯、移液管 C酒精灯、移液管、涂布器酒精灯、移液管、涂布器 D接种环、酒精灯、涂布器接种环、酒精灯、涂布器 名师大讲堂2013 高考总复习生物 答案：答案：C 解析解析：涂布平板时必须在酒精灯
15、旁操作，涂布器是用来涂布平：涂布平板时必须在酒精灯旁操作，涂布器是用来涂布平板的，移液管有刻度，可以按照需要将一定体积的菌液转移至板的，移液管有刻度，可以按照需要将一定体积的菌液转移至平板。平板。名师大讲堂2013 高考总复习生物 1概念：概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其配制出供其生长繁殖的营养基质生长繁殖的营养基质。培养基的成分、配制、主要种类培养基的成分、配制、主要种类 及其应用及其应用 名师大讲堂2013 高考总复习生物 2培养基的主要成分培养基的主要成分 名师大讲堂2013 高考总复习生物 名师大讲堂2013 高考总复习生物 3.培养基的主要种类培养基的主要种类 名师大讲堂2013 高考总复习生物
