1、书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛 犖犜 代替 进出口食品中甲胺磷残留量检测方法犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犿 犲 狋 犺 犪 犿 犻 犱 狅 狆 犺 狅 狊 狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊犻 狀犳 狅 狅 犱 狊 犳 狅 狉 犻 犿 狆 狅 狉 狋 犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布书书书前言本标准代替 出口蔬菜中甲胺磷残留量检测方法。本标准与 相比，主要变化如下：扩大了使用范围；增加了液相色谱 质谱质谱确证方法；取消了 的“抽样和制样”，增加了“试样制备与保存”；改进了样品前处理技术路线。本标准附录
2、 和附录均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国广东出入境检验检疫局、中华人民共和国湖南出入境检验检疫局、中华人民共和国浙江出入境检验检疫局、中华人民共和国江苏出入境检验检疫局。本标准主要起草人：陈捷、王岚、谢建军、林海丹、吴映旋、张莹、丁慧瑛、沈崇钰。本标准于 年首次发布，本次为第一次修订。犛 犖犜 进出口食品中甲胺磷残留量检测方法范围本标准规定了进出口食品中甲胺磷残留量检测的气相色谱测定和液相色谱 质谱质谱确证方法。本标准适用于进出口大米、绿豆、菠菜、荷兰豆、柑橘、葡萄、甘蓝、板栗、茶叶、猪肉、鸡肉、猪肝、罗非鱼、蜂蜜中甲胺磷残留量的测定
3、和确证。方法提要样品经乙腈或乙酸乙酯提取后，通过固相萃取小柱净化，采用气相色谱（火焰光度检测器）测定，外标法定量。液相色谱 质谱质谱确证。试剂和材料除另有规定外，试剂均为分析纯，水为去离子水。丙酮。乙酸乙酯。正己烷。乙腈：色谱纯。甲醇。无水硫酸钠：灼烧，在干燥器内冷却至室温，储于密闭干燥器中备用。氯化钠。正己烷 丙酮（，体积比）：取正己烷 ，加入 丙酮，混匀。甲胺磷标准物质：纯度大于等于 。甲胺磷标准储备液：准确称取适量甲胺磷，用乙酸乙酯配制成浓度为 的标准储备液。该溶液于 保存。甲胺磷标准中间溶液：准确吸取适量标准储备液，用乙酸乙酯稀释至浓度为 的标准中间溶液。该溶液在 保存。甲胺磷标准工作
4、液：使用前根据需要将标准中间溶液用乙酸乙酯稀释成适当浓度的标准工作液。石墨化碳黑固相萃取柱：，或相当者。弗罗里硅土固相萃取柱：，或相当者。氨基固相萃取柱：，或相当者。固相萃取柱：，或相当者。微孔滤膜：，有机系。仪器和设备 气相色谱仪：配有火焰光度（）检测器。液相色谱质谱质谱联用仪：配有电喷雾离子源。天平：感量为 和 。食品捣碎机。犛 犖犜 高速均质机。离心机：。旋转蒸发仪。氮气吹干仪。旋涡振荡器。振荡器。固相萃取装置。具塞塑料离心管：，聚丙烯。具塞玻璃刻度试管：。样品制备与保存 样品制备 菠菜、荷兰豆、柑橘、葡萄、甘蓝取有代表性样品约 （不可水洗），将其可食用部分切碎后，用捣碎机加工成浆状。混
5、匀，装入洁净容器，密闭，标明标记。大米、绿豆、板栗、茶叶取有代表性样品约 ，用粉碎机粉碎并通过孔径 圆孔筛。混匀，装入洁净容器，密闭，标明标记。猪肉、鸡肉、猪肝、罗非鱼取有代表性样品约 ，剔骨去皮，用绞肉机绞碎，混匀，装入洁净容器，密闭，标明标记。蜂蜜取代表性样品约 ，对无结晶的蜂蜜样品将其搅拌均匀；对有结晶析出的蜂蜜样品，在密闭情况下，将样品瓶置于不超过 的水浴中温热，振荡，待样品全部融化后搅匀，迅速冷却至室温，在融化时应注意防止水分挥发。装入洁净容器，密封，标明标记。试样保存茶叶、蜂蜜、粮谷及坚果类等试样于保存；水果蔬菜类和动物源性食品等试样于 以下冷冻保存。在抽样及制样的操作过程中，应防
6、止样品受到污染或发生残留物含量的变化。测定步骤 提取 大米、绿豆、板栗称取试样（精确至 ）于 离心管中，加无水硫酸钠（），乙酸乙酯（），匀质提取 ，振荡提取 ，离心 ，移取上清液于试管中，再分别用 乙酸乙酯洗涤残渣两次，合并提取液，以下氮吹至约，待净化。菠菜、青豆、柑橘、葡萄、甘蓝准确称取 试样（精确至 ）于 离心管中，加无水硫酸钠，乙酸乙酯，匀质提取 ，离心 ，移取上清液于 容量瓶中，再用 乙酸乙酯洗涤残渣一次，涡旋振荡 ，离心 ，合并提取液于容量瓶中，用乙酸乙酯定容至刻度。取上述的样本提取液 待净化。猪肉、鸡肉、猪肝、罗非鱼肉称取试样（精确至 ）于 离心管中，加入 无水硫酸钠，乙腈，匀质提
7、取 ，离心 ，移取上清液于 容量瓶中，再用 乙腈萃取残渣一次，合并提犛 犖犜 取液于容量瓶中，用乙腈定容至刻度，移取 提取液待净化。茶叶称取 试样（精确至 ）于 离心管中，加 水，浸泡 ，加 无水硫酸钠，振荡混匀，再分别用 乙酸乙酯提取次，旋涡振荡提取，离心 ，合并提取液，待净化。蜂蜜称取试样（精确至 ）于 离心管中，加 水，氯化钠（），振荡混匀，过固相萃取柱（），保持 后，用 乙酸乙酯淋洗，流速控制为 ，滤液过无水硫酸钠收集于 浓缩瓶中，在 以下旋转浓缩至约，待净化。净化 大米、绿豆、板栗石墨化碳黑固相萃取柱（）用 乙酸乙酯活化，弃去流出液。将待净化溶液过石墨化碳黑固相萃取柱，再用 乙酸乙酯
8、洗脱，流速控制为 ，收集全部流出液于试管中，在 以下氮吹至近干，用乙酸乙酯定容至 ，待测。菠菜、荷兰豆、柑橘、葡萄、甘蓝石墨化碳黑固相萃取柱用 乙酸乙酯活化，弃去流出液。将待净化溶液过石墨化碳黑固相萃取柱，再用 乙酸乙酯洗脱，流速控制为 ，收集全部过柱溶液于 浓缩瓶中，在 下旋转浓缩至约 ，用乙酸乙酯定容至 ，待测。猪肉、鸡肉、猪肝、罗非鱼、板栗在氟罗里硅土固相萃取柱（）上填装 无水硫酸钠，用 乙腈（）活化，弃去流出液。取 待净化液过柱，用 乙腈洗脱，收集全部流出液于 浓缩瓶，在 以下旋转浓缩至约 ；再过石墨化碳黑固相萃取柱，在柱上填装 无水硫酸钠，用 乙腈活化。将浓缩液过石墨化碳黑固相萃取柱
9、，再用 正己烷 丙酮（）洗脱，流速控制为 ，收集流出液于试管中，在 以下氮吹至约 ，用乙酸乙酯定容至 ，过 滤膜（）后，待测。茶叶在石墨化碳黑固相萃取柱上填装 无水硫酸钠，用 乙酸乙酯活化，弃去流出液。将待净化液过柱，用 乙酸乙酯洗脱，流速控制为 ，收集全部过柱溶液，在 下吹氮浓缩至约。氨基柱（）先用 正己烷 丙酮活化，将浓缩液过氨基柱后，正己烷 丙酮洗脱，流速控制为 ，收集全部流出液于试管中，在 以下氮吹至约 ，用乙酸乙酯定容至 ，待测。蜂蜜在石墨化碳黑固相萃取柱上填装 无水硫酸钠，用 乙酸乙酯活化，弃去流出液。将待净化浓缩液过石墨化碳黑固相萃取柱，乙酸乙酯洗脱，流速控制为 ，收集洗脱液于吹
10、氮管中，在 下吹氮浓缩至约 ，用乙酸乙酯定容至 ，待测。测定 气相色谱条件）色谱柱：毛细管柱，（内径），或性能相当者；）升温程序：（）（）（）；）进样口温度：；）检测器温度：；）载气：氦气（纯度 ），流量 ；犛 犖犜 ）进样模式：无分流进样；）进样量：。气相色谱测定根据样液中甲胺磷含量情况，选定峰面积相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中甲胺磷响应值均应在仪器检测线性范围内。标准工作溶液和样液等体积参插进样测定。在上述色谱条件下，甲胺磷的保留时间约为 。标准品的色谱图参见附录 中图 。定性确证 犔 犆犕 犛 犕 犛质谱条件 液相色谱参考条件）色谱柱：柱，（内径），或相当者；）柱温：；）流动相
11、：甲醇 水（，体积比）；）流速：；）进样量：。质谱参考条件）离子源：电喷雾离子源（）；）扫描方式：负离子扫描；）检测方式：多反应选择离子检测（）；）电喷雾电压（）：；）雾化气、气帘气、辅助加热气、碰撞气均为高纯氮气及其他合适气体；使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏度达到检测要求；）辅助气温度（）：；）定性离子对、定量离子对、采集时间、去簇电压及碰撞能量见表。注：非商业性声明，质谱条件是在 液相色谱 质谱质谱联用仪上完成，此处列出试验用仪器型号仅为提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家或型号的仪器。表甲胺磷定性离子对、定量离子对、去簇电压及碰撞能量被测物名称定性离子对（）采集时间
12、 去簇电压碰撞能量甲胺磷 液相色谱 质谱质谱法定性确证当进行 样品测定时，检出试样中甲胺磷的量大于方法检测限时，取 气相色谱上机测定溶液，用氮气吹干，用甲醇稀释到适当浓度，以 法定性确证。被测组分选择个母离子，个以上子离子，在相同实验条件下，如果样品中待检测物质与标准溶液中对应的保留时间偏差在 之内；且样品谱图中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的标准溶液谱图中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表规定的范围，被确证的样品可判定为甲胺磷阳性检出。标准品的子离子全扫描质谱图和多反应监测（）色谱图参见附录中图、图。表定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度 允许的相对偏差 犛 犖犜
13、 空白试验除不加试样外，按上述测定步骤进行。结果计算和表述用色谱数据处理机或按式（）计算试样中甲胺磷的残留含量，计算结果需扣除空白值。犡犃犮犞犃犿（）式中：犡 试样中甲胺磷含量，单位为微克每千克（）；犃 样液中甲胺磷的峰面积；犮 标准工作溶液中甲胺磷浓度，单位为微克每升（）；犞 最终样液的定容体积，单位为毫升（）；犃 标准工作溶液中甲胺磷的峰面积；犿 最终样液所代表试样量，单位为克（）。注：计算结果应表示到小数点后两位。测定低限、回收率 测定低限本方法茶叶的测定低限为 ，大米、绿豆、菠菜、荷兰豆、柑橘、葡萄、甘蓝、板栗、猪肉、鸡肉、猪肝、罗非鱼、蜂蜜中甲胺磷的测定低限均为 。回收率甲胺磷添加浓
14、度及回收率的实验数据见表。表甲胺磷的回收率样 品 名 称添加浓度（）回收率大米 绿豆 菠菜 荷兰豆 甘蓝 犛 犖犜 表（续）样 品 名 称添加浓度（）回收率柑橘 葡萄 板栗 茶叶 猪肉 鸡肉 猪肝 罗非鱼 蜂蜜 犛 犖犜 附录犃（资料性附录）甲胺磷标准物质气相色谱图图犃 甲胺磷标准物质（犵犔）气相色谱图（犌 犆 犉 犘 犇）犛 犖犜 附录犅（资料性附录）甲胺磷标准品犔 犆 犕 犛犕 犛质谱图和色谱图图犅 甲胺磷标准品子离子全扫描质谱图）图犅 甲胺磷标准品多反应监测（犕犚犕）色谱图（犵犔）犛 犖犜 犉 狅 狉 犲 狑 狅 狉 犱犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狊 狌 犫 狊 狋 犻
15、狋 狌 狋 犲 犱犛 犖 犿 犲 狋 犺 狅 犱犳 狅 狉犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犿 犲 狋 犺 犪 犿 犻 犱 狅 狆 犺 狅 狊狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊犻 狀狏 犲 犵 犲 狋 犪 犫 犾 犲 狊犳 狅 狉犲 狓 狆 狅 狉 狋犜 犺 犲犱 犻 犳 犳 犲 狉 犲 狀 犮 犲 狊犫 犲 狋 狑 犲 犲 狀狋 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犪 狀 犱犛 犖 犪 狉 犲犪 狊犳 狅 犾 犾 狅 狑 狊：犈 狀 犾 犪 狉 犵 犲 犱狊 犮 狅 狆 犲犪 犫 狅 狌 狋犪 狆 狆 犾 犻 犲 犱 犃 犱 犱 犲 犱犿 犲 狋 犺 狅 犱狅 犳犮 狅
16、 狀 犳 犻 狉 犿 犪 狋 犻 狅 狀犫 狔 犾 犻 狇 狌 犻 犱犿 犪 狊 狊狊 狆 犲 犮 狋 狉 狅 犿 犲 狋 狉 狔 犚 犲 犿 狅 狏 犲 犱“犛 犪 犿 狆 犾 犻 狀 犵犪 狀 犱犛 犪 犿 狆 犾 犲犘 狉 犲 狆 犪 狉 犪 狋 犻 狅 狀”犻 狀犛 犖 ，犪 犱 犱 犲 犱“犘 狉 犲 狆 犪 狉 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱狊 狋 狅 狉 犪 犵 犲狅 犳 狋 犲 狊 狋狊 犪 犿 狆 犾 犲”犐 犿 狆 狉 狅 狏 犲 犱狅 狀狋 犲 犮 犺 狀 犻 犮 犪 犾 犾 犻 狀 犲犪 犫 狅 狌 狋犲 狓 狋 狉 犪 犮 狋 犻 狅 狀狅 犳狊 犪 犿 狆 犾 犲 犃 狀 狀 犲 狓犃犪 狀 犱犅狅 犳 狋 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犪 狉 犲 犻 狀 犳 狅 狉 犿 犪 狋 犻 狏 犲犪 狀 狀 犲 狓 狊 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊狆 狉 狅 狆 狅 狊 犲 犱犫 狔犪 狀 犱犻 狊狌 狀 犱 犲 狉狋 犺 犲犮 犺 犪 狉 犵 犲 犱狅 犳狋 犺 犲犆 犲 狉 狋 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犃
