1、I C S 1 1.0 2 0C 5 6巧旨中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准G B/T 1 7 0 9 9 一 1 9 9 7儿童少年血红蛋白筛检S c r e e n i n g o f h e m o g l o b in f o r c h il d r e n a n d a d o l e s c e n t s1 9 9 7 一 1 1 一 1 1 发布19 9 8 一 1 2 一 0 1实 施国家技术监督局，*中 华 人 民 共 和 国 卫 生 部“一 GB/T 17 099 一 1 997前言 贫血是儿童少年比较常见的营养问题，主要是由缺铁所致。贫血对儿童少年生长发育
2、不利。特别是对其体力，智力和免疫力等发育产生不良影响。防治贫血是儿童少年保健工作的重要任务之一。由于各种类型的贫血最终必然导致血红蛋白浓度下降，血红蛋白值测定是筛检和诊断贫血最重要的指标，确定血红蛋白正常值标准对筛检贫血和评价防治效果十分重要。某些国家和地区只有血红蛋白推荐值，国内外尚无统一的标准。我国多年来多采用 WH O1 9 7 2年提出的推荐值，但是，近年不少国内外学者指出该推荐标准比较粗，不符合儿童少年生长发育规律，呼吁作出改进。因此，制定适合我国儿童少年实际情况的血红蛋白标准实属必要。本标准从 1 9 9 8年 1 2 月 1日 起实施，1 9 9 8 年 1 2月1日 起有关儿童
3、少年血红蛋白筛检工作，均应符合本标准规定。本标准的附录A是标准的附录。本标准由中华人民共和国卫生部提出。本标准由北京医科大学儿童青少年卫生研究所、河北省卫生防疫站、山木省卫生防疫站负责起草。本标准的主要起草人:谢华丽、杨育林、霍卓平、刘绣云。本标准由卫生部委托技术归口单位中国预防医学科学院负责解释。中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准儿童少年血红蛋白筛检c B/T 1 7 0 9 9 一1 9 9 7S c r e e n i n g o f h e mo g l o b i n f o r c h i l d r e n a n d a d o l e s c e n t s范 围 本
4、标准规定了儿童少年贫血筛检的血红蛋白标准和血红蛋白测定方法.本标准适用于海拔1 0 0 0 m以下地区6 1 7岁汉族儿童少年的贫血筛检。对于海拔高于1 0 0 0 m的地区，可参照每增加 1 0 0 0 m血红蛋白正常值下限在本标准基础上增加 4。少数民族儿童可参照使用。2定义 本标准采 用下 列定 义。2.1 贫血a n a e mia 指外周血中单位容积内血红蛋白浓度、红细胞计数及(或)红细胞压积低于相同年龄、性别和地区的正常标准。血红蛋白浓度是筛检贫血最简单最有意义的指标。2,2 血红蛋白浓度正常 值下限 l o w l i m i t o f n o r m a l c o n c
5、e n t r a t io n o f h e m o g l o b in 血红蛋白浓度正常值是一个范围值。通常将健康及营养状况良 好人群血红蛋白浓度的第三或者第五百分位数作为血红蛋白正常值下限.3儿1 k少年血红蛋 白正常值下 限儿童少年血红蛋白正常值下限见表1:表1 儿童少年血红蛋臼正常值 下限年 岁1性别血 红，白 正 常 值 下 限.g/L110120115130120:二男、女1 5-1 9 】女健康检查中发现血红蛋白浓度低于此正常值下限者初筛为贫血。男女男3.24血红蛋 白侧定方法(见附录 A)国家技术监份局 1 9 9 7 一 1 1 一，1 批准19 98 一 12 一 0
6、1实施cB/T 170 99 一 1 997 附录A (标准的附录)血红蛋 白测定方法4 l 取血 方法 毛细管采 血。A l.，器材 7 5 0 o 的酒精棉球，消毒的干棉球和三棱针，经水银标定合格的血红蛋自吸骨或定量毛细管。A l.2 采血部位 左手无名指末端。不能采耳垂血，耳垂血的血红蛋白浓度高于指血A l.3 针刺准备 用温水洗手，擦干后，用酒精棉球消毒，待干后始可刺针，以避免残余酒精稀释血样A l.4 针刺程序 用三棱针向无名指末端垂直穿刺，深约 2-3 m m，使血流出.如血液不易流出，可在局部稍加压力，但不能用力挤压。用干棉球擦去第一滴血，然后用血红蛋白吸管吸取需要的血量。取血后
7、用干棉球压针孔，直到出血停止。针刺后2 h内，保护针孔不受污染。A l.5 注意事项 采血前勿剧烈运动，因剧烈运动后血红蛋白浓度增加。勿大量饮水，大量饮水可使血红蛋白浓度暂时下降。A 2 血红蛋白测定方法 氰化 高铁 血红蛋白法。A2.1原理 在溶液中，血红蛋白的两价铁原子经高铁献化钾氧化为三价铁，形成高铁血红蛋白。高铁血红蛋白与叔化钾的佩离子起反应，生成氰化高铁血红蛋白。氛化高铁血红蛋白极为稳定，在波长 5 4 0 n m处，其吸光度和浓度成正比，用光电比色计或分光光度计测定吸光度，然后从标准曲线上可查得血红蛋白值。加人非离子表面活化剂可增快红细胞溶解，并使由于血脂蛋白沉淀所致的混浊减少到最
8、低限度。A 2.2 试剂和氰化高铁血红蛋白稀释液的配制 所用试剂均需分析纯。精确称取:氰化钾(K C N)(剧毒)0.0 5 g,高铁氰化钾 K,F e(C N)0.2 0 0 g,磷酸 二氢钾(K H 2 P O,)O.1 4 0 g,以上试剂用2 0 0 -3 0 0 mt燕馏水溶解，转人1 1容量瓶中，加人 1 m L非离子表面恬化剂(T r it o n X-1 0 0)，然后用燕馏水稀释至 i f，混匀后储存在棕色玻璃瓶中。避光。本稀释液应清晰透明，呈淡黄色，p H值在 7.0-7.4之问。本试液在 5 4 0 n m波长处，以蒸馏水作空白校零.吸光度应为零。在密闭棕色瓶中，试液可保
9、存一个月，但如出现混浊应弃去勿用。稀释液不得冷冻，冷冻可使高铁氰化钾破坏分解，溶液退色A 2.3 仪器 光电 比色 计或分光光度计。每次测定血红蛋白以前均需用氰化高铁血红蛋白标准液校正，绘制标准曲线。为保证电压的稳定应加稳压器%2-4操作程序 a)于 I O mI带塞 比色管 中加 5 M氰化铁血红蛋 白稀释 液c B/T 1 7 0 9 9 一1 9 9 7 切 用血红蛋 白吸管准确吸取 0.0 2 m1血样，管内不得有气泡，擦 去管外血液。发现管 内有细微血丝者，说 明血液凝 固应弃去洗净重采。c)置吸管于稀释液中，使管尖在液面下，轻轻自管中推出血液，用稀释液冲洗吸管三次，盖紧比色管塞，颠
10、倒或旋转混匀5 6 次，使血红蛋白与稀释液充分混匀。d)将血红蛋白溶液放置 1 0 min以上，使其反应完全。溶液不应混浊或有沉淀。e)用分光光度计或光电比色计，于 5 4 0 n m波长处，以稀释液为空白，测定样品吸光度，查标准曲线得结果;或分别测定已知浓度血红蛋白标准液和待测样品的吸光度.然后按下列公式计算结果。f)计算公式 A(g/L)=B/C X D式中:A 待测样品血红蛋白的浓度，9/L;B 已知浓度血红蛋白标准液的吸光度;C 待测样品的吸光度;D血红蛋白标准液浓度.g/L,A 2.5 当测试大量样品时，每小时应用标准液测试一次，以检查仪器的稳定性。A 2.6 血样放人稀释液后，应将
11、盖塞紧，置暗处，可存放 1 2 h。如需储存超过 1 2 h，应放在4-1 0 C冰箱中，但不宜超过一周。自冰箱中取出后，应使管内溶液升至室温.摇匀后测定。A 2.7 标准曲线的绘制 a)佩化高铁血红蛋白标准液 应采用血液学标准化国际委员会鉴定合格的标准液。此标准液颜色稳定，在 4 C 左右冰箱中放置一年，吸光度无任何改变.但不可冰冻。b)常用的标准液有两种，一种可直接测得吸光度，另一种则需稀释，稀释方法如表 A 1:表 A1管 号标准液.L试 液,m L123456432)02346 c)以标准液吸光度数值为纵坐标，以血红蛋白 浓度(g/1)为横坐标，在普通坐标纸上 绘制标准曲线。A 2.8 亦可应用电子仪器或微型光度计侧定血红蛋白浓度不管使用何种比色计，使用前均需用标准液校正仪器，并按比耳定律原理绘制标准曲线.
